ទំព័រ_បដា

PCR គឺជាអ្វី ហើយហេតុអ្វីវាសំខាន់?

PCR ឬប្រតិកម្មខ្សែសង្វាក់ polymerase គឺជាបច្ចេកទេសដែលត្រូវបានប្រើដើម្បីពង្រីកលំដាប់ DNA ។វាត្រូវបានបង្កើតឡើងដំបូងក្នុងទសវត្សរ៍ឆ្នាំ 1980 ដោយ Kary Mullis ដែលទទួលបានរង្វាន់ណូបែលគីមីវិទ្យាក្នុងឆ្នាំ 1993 សម្រាប់ការងាររបស់គាត់។PCR បានធ្វើបដិវត្តន៍ជីវវិទ្យាម៉ូលេគុល ដែលអនុញ្ញាតឱ្យអ្នកស្រាវជ្រាវពង្រីក DNA ពីគំរូតូចៗ និងសិក្សាវាយ៉ាងលម្អិត។
o1
PCR គឺជាដំណើរការបីដំណាក់កាលដែលកើតឡើងនៅក្នុងម៉ាស៊ីនកំដៅដែលជាម៉ាស៊ីនដែលអាចផ្លាស់ប្តូរសីតុណ្ហភាពនៃល្បាយប្រតិកម្មយ៉ាងឆាប់រហ័ស។ជំហានទាំងបីគឺ denaturation, annealing, និង extension ។
 
នៅក្នុងជំហានដំបូង ការ denaturation DNA ពីរខ្សែត្រូវបានកំដៅទៅសីតុណ្ហភាពខ្ពស់ (ជាធម្មតានៅជុំវិញ 95 ° C) ដើម្បីបំបែកចំណងអ៊ីដ្រូសែនដែលកាន់ខ្សែទាំងពីរជាមួយគ្នា។នេះបណ្តាលឱ្យមានម៉ូលេគុល DNA ខ្សែតែមួយពីរ។
 
នៅក្នុងជំហានទីពីរ ការ annealing សីតុណ្ហភាពត្រូវបានបន្ទាបទៅប្រហែល 55 ° C ដើម្បីអនុញ្ញាតឱ្យ primers ចូលទៅក្នុងលំដាប់បំពេញបន្ថែមនៅលើ DNA ខ្សែតែមួយ។Primers គឺជាបំណែកខ្លីនៃ DNA ដែលត្រូវបានរចនាឡើងដើម្បីផ្គូផ្គងលំដាប់នៃការចាប់អារម្មណ៍លើ DNA គោលដៅ។
 
នៅក្នុងជំហានទីបី ការពង្រីក សីតុណ្ហភាពត្រូវបានកើនឡើងដល់ប្រហែល 72°C ដើម្បីអនុញ្ញាតឱ្យ Taq polymerase (ប្រភេទនៃ DNA polymerase) សំយោគខ្សែ DNA ថ្មីពី primers ។សារធាតុ Taq polymerase មានប្រភពមកពីបាក់តេរីដែលរស់នៅក្នុងប្រភពទឹកក្តៅ និងអាចទប់ទល់នឹងសីតុណ្ហភាពខ្ពស់ដែលប្រើក្នុង PCR ។

o2
បន្ទាប់ពីមួយវដ្តនៃ PCR លទ្ធផលគឺពីរច្បាប់ចម្លងនៃលំដាប់ DNA គោលដៅ។ដោយធ្វើម្តងទៀតនូវជំហានទាំងបីសម្រាប់វដ្តមួយចំនួន (ជាធម្មតា 30-40) ចំនួននៃការចម្លងនៃលំដាប់ DNA គោលដៅអាចត្រូវបានកើនឡើងជាអិចស្ប៉ូណង់ស្យែល។នេះមានន័យថា សូម្បីតែចំនួនតូចមួយនៃ DNA ចាប់ផ្តើមអាចត្រូវបានពង្រីកដើម្បីបង្កើតបានរាប់លាន ឬរាប់ពាន់លានច្បាប់ចម្លង។

 
PCR មានកម្មវិធីជាច្រើនក្នុងការស្រាវជ្រាវ និងការវិនិច្ឆ័យ។វាត្រូវបានគេប្រើនៅក្នុងពន្ធុវិទ្យាដើម្បីសិក្សាពីមុខងារនៃហ្សែន និងការផ្លាស់ប្តូរ នៅក្នុងការធ្វើកោសល្យវិច្ច័យដើម្បីវិភាគភស្តុតាង DNA ក្នុងការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យជំងឺឆ្លង ដើម្បីរកមើលវត្តមានរបស់ភ្នាក់ងារបង្កជំងឺ និងក្នុងការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យមុនពេលសម្រាល ដើម្បីពិនិត្យរកមើលជំងឺហ្សែននៅក្នុងទារក។
 
PCR ក៏ត្រូវបានកែសម្រួលសម្រាប់ការប្រើប្រាស់ក្នុងការប្រែប្រួលមួយចំនួនដូចជា PCR បរិមាណ (qPCR) ដែលអនុញ្ញាតឱ្យបរិមាណ DNA ត្រូវបានវាស់ និងបញ្ច្រាស PCR (RT-PCR) ដែលអាចត្រូវបានប្រើដើម្បីពង្រីកលំដាប់ RNA ។

o3
ទោះបីជាមានកម្មវិធីជាច្រើនក៏ដោយ PCR មានដែនកំណត់។វាទាមទារចំណេះដឹងអំពីលំដាប់គោលដៅ និងការរចនានៃ primers ដែលសមស្រប ហើយវាអាចងាយនឹងមានកំហុស ប្រសិនបើលក្ខខណ្ឌប្រតិកម្មមិនត្រូវបានធ្វើឱ្យប្រសើរត្រឹមត្រូវ។ទោះបីជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ជាមួយនឹងការរចនា និងការអនុវត្តការពិសោធន៍ដោយប្រុងប្រយ័ត្ន PCR នៅតែជាឧបករណ៍ដ៏មានឥទ្ធិពលបំផុតមួយនៅក្នុងជីវវិទ្យាម៉ូលេគុល។
o4


ពេលវេលាបង្ហោះ៖ ថ្ងៃទី ២២ ខែកុម្ភៈ ឆ្នាំ ២០២៣